1.標(biāo)準(zhǔn)的曲線方法:
該方法是根據(jù)光的吸收定律,如果液層的厚度和入射波長(zhǎng)都沒(méi)變的話,它會(huì)在一定的濃度范圍之內(nèi),測(cè)量的吸光度和濃液中待測(cè)物質(zhì)的濃度成正比。這個(gè)時(shí)候要先配置已知準(zhǔn)確濃度的標(biāo)準(zhǔn)濃液,然后選擇坡長(zhǎng)處分別測(cè)其吸光度A,再以標(biāo)準(zhǔn)的濃液的濃度C為橫坐標(biāo),以相應(yīng)的吸光度A為縱坐標(biāo),繪制相關(guān)A-C關(guān)系圖,可以得出一條通過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的直線,這個(gè)直線叫做標(biāo)準(zhǔn)曲線。在相同條件測(cè)出試樣濃液的吸光度,然后還可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出試樣濃液的濃度。
2.比較法
在相同條件下,配制被測(cè)試樣溶液及與其濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在所選波長(zhǎng)處分別測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度和試樣溶液的吸光度,根據(jù)朗伯比爾定律:
A=Kbc
A標(biāo)=Kbc標(biāo)
A樣=Kbc樣
c樣=c標(biāo)A樣/A標(biāo)
比較適用于線性關(guān)系好且通過(guò)原點(diǎn)的情況
3.一元線性回歸法
用吸光度A和濃度c做工作曲線,橫坐標(biāo)為自變量c,縱坐標(biāo)為因變量A,通常自變量可以控制和精確測(cè)量,因變量是隨機(jī)變量,有誤差。根據(jù)散點(diǎn)畫一條直線,稱這條直線為回歸線
若直線通過(guò)所有實(shí)驗(yàn)點(diǎn),可以說(shuō)A與c是密切線性相關(guān)。如果實(shí)驗(yàn)點(diǎn)不在直線上,為使誤差達(dá)到最小,需要進(jìn)一步線性回歸能,設(shè)回歸方程為
Y=a+bx
式中a--回歸線在縱軸上的截距; b--回歸線的斜率;
確定a、b兩個(gè)參數(shù),即可得到線性回歸方程。用數(shù)學(xué)上的小二乘法可以求得a、b兩個(gè)參數(shù)。帶有線性回歸的計(jì)算器可實(shí)現(xiàn)這一計(jì)算,只需輸入標(biāo)準(zhǔn)系列的濃度和相應(yīng)的吸光度即可。
確立線性回歸方程后,將樣品測(cè)得的吸光度代入方程,即可求出樣品的濃度。
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